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使用顯色液時需要注意哪些要點？
更新時間：2022-03-25 點擊次數：1751次
顯色液SDS-PAGE電泳后，蛋白質按照分子量大小分離，轉移到固相載體( 例如硝酸纖維素薄膜)后，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶標記的二抗體起反應，經過底物顯色以檢測電泳分離的特異性的蛋白。
顯色液的使用要點：
1.請根據一抗來源選擇試劑盒.
2 westem blotting DAB顯色法操作簡單，但其敏感性與ECL發光發有一定的差距，一般只適用于豐度較高的蛋白.
3.可以根據顯色結果來優化實驗反應時間。如背景過深，可延長膜封閉時間，加長較終漂洗次數與時間。如果條帶過弱，同遠長抗體孵育時間。
4.如果*沒有條帶，請檢查前期蛋白處理及實驗過程，如果確認無誤， 反復兩次依舊無結果，請換用ECL發光法顯色。
5. TBST (0.01M)配制方法:稱取NaCl8.5g，Tris 1.21g，用800ml的雙蒸水溶解，用鹽酸調PH到76,再
加入0SmlTween-20，用雙蒸水加至1000ml,混勻即可。(也可按照自己的配制習慣來配制)
顯色液的保存：
-20C避光密閉保存，- 年有效。若經常使用，可將封閉試劑，抗體稀釋液和20倍DAB顯色液B存放于2-8C以方便使用。
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